為了保證ELISA試劑盒試驗(yàn)的穩(wěn)定及順利完成，下面給大家講解使用洗板機(jī)洗板時應(yīng)注意以下三個步驟。
一、豬ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu)：
1、血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱量的試管。收集血液后，000*g離心0分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液：000×g離心0分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。000×g離心0分鐘，取上清液。
5、保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二、豬ELISA試劑盒的注意事項(xiàng)：
1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2、豬ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
7、加入試劑的順序，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
8、按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
三、豬ELISA試劑盒的操作方法：
1.包被：在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育小時，然后洗滌。
3.加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體0.ml。
4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入底物溶液0.ml，37℃0～30分鐘。
5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入酸0.05ml。

6.結(jié)果判定：豬ELISA試劑盒可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或較淺，依據(jù)所呈顏色的深淺。

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